上海紀革森實業有限公司

  一、早期生物監測采用菌片式生物指示物，將芽孢接種于紙質菌片上，滅菌循環完成后需通過無菌技術轉移至培養基中在合適的溫度下進行培養，時間為7天，定期觀察培養基的性狀，出現渾濁則提示有芽孢存活。需要相同批號的未滅菌芽孢菌片和無菌培養基分別作為陽性對照和陰性對照進行培養。陽性對照培養結果應為陽性，提示培養程序和條件合格，芽孢在滅菌前存活；陰性對照培養結果應為陰性，提示培養操作的無菌技術要求符合標準，培養基滅菌合格。由于其培養過程復雜，技術要求高，周期長，容易污染和受外界影響而出現假性結果，目前在醫院滅菌監測中很少應用。   

△圖為菌片

△圖為無菌培養操作

  二、20世紀70年代3M公司推出了自含式生物指示物，將細菌芽孢生長所需要的培養基與芽孢菌片放置于一個裝置中，菌片和培養基安瓿滅菌前相互獨立，滅菌暴露后擠碎安瓿，使芽孢與培養基充分接觸并在適當的溫度下培養，若芽孢未被完全滅活，芽孢生長會產生酸性代謝產物，培養基中所含的pH值敏感指示染料會變為黃色。自含式生物指示物可有效防止外界雜菌的污染，因此只需要做陽性對照，而且培養周期一般為24－48小時，但是因培養時間較長，已不能適應現代醫療機構越來越快器械周轉的需求。

△圖為自含式生物指示物

  三、20世紀90年代，為適應消毒供應行業的迅速發展，3M公司推出具有里程碑意義的世界第一款快速閱讀自含式生物指示物，將生物指示物的培養時間由48小時縮短到3-4小時。

△圖為快速生物指示物

之后3M持續引領生物指示物技術領域的發展，進一步優化快速閱讀技術，于2013年率先在全球推出極速生物指示物，將培養時間進一步縮短到1小時，使生物指示物快速閱讀技術的發展推動到前所未有的高度，成為業界的里程碑性事件。

△圖為極速生物指示物

極速生物指示物判讀原理與快速生物指示物的判讀原理相同，未完全滅活的芽孢在萌發過程中會產生α-葡萄糖苷酶，該酶可促進培養基中非熒光底物發生水解反應，生成具熒光活性的產物（4-MU）。專用的快速培養閱讀器配有熒光檢測系統，如果檢測到特定強度的熒光信號，即判斷培養結果為陽性。同時快速生物指示物也可提供48小時的pH變色指示功能。

圖為熒光判讀原理（以極速生物指示物為例）

早在2008年美國醫療機構消毒和滅菌指南（Guideline for Disinfection and Sterilization in Healthcare Facilities）指出“快速生物指示物通過檢測嗜熱脂肪桿菌相關酶水解非熒光底物生成的熒光物質所發出的熒光得到生物監測結果，這一產品已經在市場上銷售超過十年。研究表明，快速生物指示物的靈敏度與常規生物監測的靈敏度相同，快速生物指示物的可靠性和24、48小時以及7天培養的可靠性相同”。因此，使用培養閱讀器培養時，當閱讀器顯示“+”或“-”（陽性/陰性）結果后，則不需要保留生物指示劑。培養閱讀器顯示的結果就是最終的結果，生物指示劑已經可以丟棄。